蛋白多肽類藥物具有作用位點(diǎn)專一性強(qiáng)、療效具體等優(yōu)點(diǎn)，近年來，其研究與開發(fā)已成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。雙硫鍵在維持多肽和蛋白質(zhì)的空間立體結(jié)構(gòu)以及維持它們所決定的生物活性方面具有重要作用。在蛋白質(zhì)或多肽分子中，二硫鍵是由兩個(gè)巰基(-SH)在蛋白質(zhì)或多肽分子中氧化形成的S-S共價(jià)鍵。肽鏈上不同位置的氨基酸之間形成的二硫鍵，能將肽鏈折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)。

肽類分子通常分子量較大，空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜，在結(jié)構(gòu)上形成二硫鍵需要兩個(gè)半胱氨酸在空間距離上接近。另外，巰基在多肽結(jié)構(gòu)中還原態(tài)的化學(xué)性質(zhì)是活潑的，易發(fā)生其它的副反應(yīng)，肽鏈上的其它側(cè)鏈也可能發(fā)生一系列的修飾，因此，由肽鏈進(jìn)行修飾的氧化劑和氧化條件是反應(yīng)的關(guān)鍵因素，反應(yīng)機(jī)理復(fù)雜，可能是自由基反應(yīng)，也可能是離子反應(yīng)。

在肽類化合物的二硫鍵修飾中，分子內(nèi)或分子間一對二硫鍵的合成往往比較容易，反應(yīng)條件有多種選擇，如空氣氧化、DMSO氧化等溫和的氧化工藝，也可采用H2O2、I2、汞鹽等激烈的反應(yīng)條件，反應(yīng)產(chǎn)物分離容易，純化收率高。

在多肽合成中，氣氧化法制備二硫鍵是最經(jīng)典的方法，并在前期研究中取得了良好的效果。用空氣氧化的方法，通常是在近中性或弱堿性條件下(PH值6.5~10)，將巰基置于還原態(tài)的多肽溶解于水中，反應(yīng)24小時(shí)以上。為減少分子間可能形成二硫鍵，本方法常需在低濃度下進(jìn)行。

碘氧化方法在多肽合成中也有廣泛的應(yīng)用，一般將多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸溶液中，以碘10~15mol/L為單位，以15mol/L為單位進(jìn)行氧化，反應(yīng)15~40min。如果肽鏈上含有對碘比較敏感的殘基Tyr,Trp,Met和His，則氧化條件控制得更精確，在完成氧化后，立即加入維生素C或硫代化硫酸鈉去除過量的碘。

如果在一個(gè)肽鏈上形成兩對或更多的二硫鍵，則反應(yīng)過程會(huì)變得比較復(fù)雜。為使多肽固相合成，需預(yù)先設(shè)計(jì)幾對二硫鍵形成的次序和方法路線，選擇不同的側(cè)鏈巰基保護(hù)基，利用它們的特性差異，逐步氧化形成兩對或多對二硫鍵。常用的巰基保護(hù)基包括trt、Acm、Mmt、tBu、Bzl、Mob、Tmob等。列出了由2-氯化鈉樹脂和Rink樹脂作為載體合成多對二硫鍵的兩條路線：

在肽合成過程中，二硫鍵的形成一直是一個(gè)難題，通過不斷的研究和積累，我公司已具備相當(dāng)成熟的多對二硫鍵合成工藝，目前我公司已能成功合成出三對、四對二硫鍵的多肽。持續(xù)克服實(shí)驗(yàn)困難，不斷提高產(chǎn)品質(zhì)量，為達(dá)到客戶要求而不懈努力是我們一貫堅(jiān)持的宗旨。

成功案例：

以DC*TSHNGAC*NHSHC*C*SNVC*NTWAHLC*T為序列，成功地用三對二硫鍵對其進(jìn)行了修飾。

健康計(jì)劃(HPLC)分析：

質(zhì)譜(MS)分析：

        原創(chuàng)文章如有轉(zhuǎn)載，請注明出處“本文首發(fā)于固拓多肽合成生物科技有限公司（vonev.cn）”