在剖析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和作用時，最重要的是怎樣得到高純的蛋白?，F(xiàn)如今最常見的方式便是親和力標簽系統(tǒng)，早已成為重組蛋白檢測和提純中一個必不可少的專用工具。不但如此，它還很有可能對總體目標蛋白的理化性質(zhì)造成有益的影響，乃至可以提升重組蛋白的生產(chǎn)量。親和力標簽有各種不同的分類方法。依據(jù)含量的尺寸，可分成“小分子短肽標簽”和“蛋白質(zhì)標簽”兩類。固拓小編特意為大家撰寫了“詳說小分子短肽標簽”系列文章，希望可以協(xié)助大家從諸多蛋白標簽中挑選適合自身研究課題的。

目前除開His-tag以外另一個應用很普遍的親和力標簽-FLAG-tag。FLAG-tag被廣泛運用于各種表達系統(tǒng)中,比如大腸桿菌，酵母菌和哺乳動物細胞。FLAG-tag由八個氨基酸殘基構(gòu)成，編碼序列是Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys（D-Y-K-D-D-D-D-K）。因為它的含量不大，只有1.01kDa，因此 不容易遮住融合蛋白中別的的蛋白表位和結(jié)構(gòu)域，更不易更改融合蛋白的作用、代謝或是運送。

標簽編碼序列中四個連到的天冬氨酸讓全部標簽具有純天然的親水特點（hydrophilicity）。這樣一來，它就非常容易定位在融合蛋白的表層，便于運用抗原來檢測。特別注意的是，芬芳環(huán)在抗原-抗原結(jié)合中具有非常大的功效，因此 這一標簽的第二位殘基刻意設計的是酪氨酸（tyrosine）。由于FLAG-tag自身就具有免疫原形，因此 它有３個特異性的單抗，分別是M1單抗，M2單抗，M5單抗。這就促使融合蛋白檢測和純化都變得很便捷?？墒窃囼炚f明FLAG-tag和特異性的抗原結(jié)合力沒有His-tag和Ni2+-NTA或是別的一些親和力標簽和檢測系統(tǒng)的結(jié)合力那么牢固，融合蛋白的純度只有做到90%上下(Terpe,2003)。但是沒事兒，大家還能夠把三個FLAG-tag設計在一起（DYKDHDG-DYKDHDI-DYKDDDDK），提升和抗原的結(jié)合以及檢測的敏感度。試驗證實，3FLAG乃至能檢測到飛量級的融合蛋白，比別的一切系統(tǒng)約高于20到200倍，尤其適合于哺乳動物細胞表達系統(tǒng)低中表達水準蛋白質(zhì)的檢測。

與此同時，FLAG-tag含有一個腸激酶（enterokinase）的切割位點（D-D-D-D-K-X1）。實驗證明X1這個氨基酸殘基是影響腸激酶的切割效率的。恰巧賴氨酸（Lysine）在X1的位置時，切割效率達到了85%，僅次于丙氨酸 （alanine）和甲硫氨酸 （methionine）(Einhauer & Jungbauer, 2001)。通常情況下，FLAG-tag被放置在N端，通過腸激酶切掉后，就會還原融合蛋白的原始序列和結(jié)構(gòu)。

寫到最后：

Flag-tag多肽用作有機和醫(yī)藥中間體。固拓生物科技有限公司為一家專業(yè)生產(chǎn)多肽合成、多肽定制的生產(chǎn)廠家，也有供應Flag-tag多肽原材料，歡迎需要購買原料藥的公司前來購買。

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