怎樣溶解多肽

多肽的溶解性非常大水平上在于多肽的極性。酸性的蛋白質(zhì)溶解于堿性溶液，而偏堿蛋白質(zhì)能溶于酸性溶液，帶有很多沒有正電荷的極性氨基酸殘基或疏水性碳水化合物的疏水性多肽和中性多肽可先溶解于少量有機(jī)溶液中，如DMSO、DMF、醋酸、乙腈、乙醇、丙醇或等保，隨后放水（純凈水）稀釋液。必須留意的是，帶有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不能用DMSO溶解，由于DMSO很有可能導(dǎo)致主鏈空氣氧化。

溶解性檢測的重要性

在不確定性某條肽鏈的溶解性，為了更好地防止出現(xiàn)多余的損害。小劑量地開展多肽溶解檢測是很必須的。在沒有危害多肽理化性質(zhì)的前提條件下，必須檢測不一樣的溶劑，直至尋找最適當(dāng)?shù)囊环N。超聲解決有利于粉碎顆粒并提升溶解性。（留意：超聲解決會造成溶液發(fā)熱和多肽溶解，因此時間不適合太長。）檢測多肽溶解性并并不是沒有依據(jù)的隨便采用溶劑。多肽序列本身的理化性質(zhì)是迅速尋找適合溶劑的根據(jù)之一。有關(guān)多肽溶劑挑選：

1.

假如整篇肽所帶正電荷是呈陽性的，表明該肽是偏堿的。可先試著用純凈水來溶解；如果不溶解水，然后試著用少量10%-25%醋酸溶解，假如依然不成功得話，加上一些TFA（10-50微升）來助溶，隨后自來水稀釋液至理想化濃度值。

2.

假如整篇肽所帶正電荷是呈陰性的，表明該肽是酸性的。酸性的多肽能夠試著用PBS（PH7.4）來溶解，如果不溶得話，加上少量的堿性溶劑，如0.1M的硝酸鉀，隨后放水稀釋液至理想化濃度值。帶有分散半胱氨酸的多肽應(yīng)溶解減壓蒸餾的酸性緩沖溶液中，由于當(dāng)PH值超過7時，巰基會被快速空氣氧化成二硫化物。

3.

假如整篇肽正電荷是零，表明肽是中性的。中性肽一般溶解有機(jī)溶液。最先，試著加上少量乙腈、乙醇或等保。針對高寬比親水性的多肽，可應(yīng)用少量的二甲基亞砜溶解，隨后自來水稀釋液至理想化濃度值。針對帶有隨意半胱氨酸的肽，需應(yīng)用DMF而不是DMSO。針對有集聚趨向的肽，可加上5M鹽酸胍或8M尿素溶液，隨后開展必需的稀釋液。

填補(bǔ)：

將每一個酸性氨基酸取值為－1，包含天冬氨酸（D）、磷酸（E）、及其羧基尾端-COOH。每一個堿性氨基酸取值為＋1，包含精氨酸（R）、磷酸氫鈣（K）、組氨酸（H）及其羥基尾端-NH2。隨后測算全部多肽的電荷數(shù)。

堿性氨基酸：K,R,H,N-terminus

酸性氨基酸：D,E,C-terminus

極性中性碳水化合物：F,I,L,M,V,W,Y

非極性親水性碳水化合物：G,A,S,T,C,N,Q,P,酰胺基，酰胺基

舉例子：

RKDEFILGASRHD:(+5)+(-4)=+1覺得是偏堿多肽，

EKDEFILGASEHR:(+4)+(-5)=-1覺得是酸性多肽，

AKDEFILGASEHR:(+4)+(-4)=0覺得是中性多肽，

提議：為了更好地避免或盡量避免多肽溶解，請將多肽以凍干粉方式儲存在-20°C，-80°C更好。假如必須儲存溶液肽，最好是分為樣品儲放，以防止不斷凍融。一份樣品融凍后未用完，應(yīng)丟掉。病菌溶解有時候會變成 溶液肽的不便，因此請將肽溶解無菌水或肽溶液過慮殺菌。

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