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適用范圍:多肽切割的操作過程
負(fù)責(zé)人:多肽組切割操作人員及QA
規(guī)程:
1. 切割準(zhǔn)備工作
1.1. 搭建切割實(shí)驗(yàn)裝置
將收縮抽干后的樹脂倒入帶蓋的玻璃反應(yīng)器中,搭建好機(jī)械攪拌裝置
1.2. 配置好切割液(詳見切割液配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程)
2. 開始切割
將切割液倒入反應(yīng)器,開啟機(jī)械攪拌裝置,攪拌2小時(機(jī)械攪拌裝置的搭建使用詳見無級調(diào)速攪拌器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程)
3. 過濾樹脂
使用砂芯漏斗濾去樹脂,用TFA將樹脂洗滌3遍(洗滌用TFA的量為剛剛沒過樹脂即可,加入TFA后用刮刀攪拌后抽濾)
4. 析出多肽粗品
向50L塑料溶劑桶倒入乙醚(倒入乙醚的體積為切割液體積的10倍),邊攪拌邊向乙醚中倒入切割液。
5. 減壓抽濾獲得粗品
將多肽懸浮液用布氏漏斗抽濾,得到固體后,用乙醚洗滌多次直至濾出的乙醚無色透明,無明顯的TFA味道為止。
6. 烘干和稱量
將多肽用紅外燈烘干,稱出粗品重量,放冰箱保存
注意事項(xiàng):
1. 配制切割液或者取用切割液時動作必須緩慢,防止切割液飛濺
2. 機(jī)械攪拌速度不宜過快,防止樹脂飛濺到液面以上,不參與反應(yīng)
3. 過濾樹脂時應(yīng)用TFA洗滌反應(yīng)器多次,直至反應(yīng)器內(nèi)無樹脂殘留,洗出的液體無色透明
4. 乙醚提前放入冰箱冷藏30分鐘
5. 烘干多肽時注意多肽狀態(tài),若發(fā)現(xiàn)多肽吸潮,需重新用乙醚洗滌,重新烘干
6. 注意保存實(shí)驗(yàn)記錄,實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,多肽粗品的顏色及重量
寫到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
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