填充柱的柱效、背壓會受多肽色譜填料顆粒的粒徑和分布情況所影響。小粒徑色譜填料的價格相對來說會高一些，填料粒徑小不僅會導致填充柱的柱效高還會導致柱壓變高，若要提高分離度，必須要在相同的條件下提高柱效。填料粒徑小還會對色譜系統(tǒng)要求高，設(shè)備投資大。

基于以上原因，多肽色譜填料的粒徑大小不同，分離效率和成本也不同，所以通常粒徑在10微米以上的多肽色譜填料顆粒應用于工業(yè)制備，粒徑在3-5微米之間的填料用于常規(guī)HPLC，2微米以下的色譜填料常用于UPLC。

同樣，色譜填料的粒徑分布情況對高效液相色譜分離過程也有一定的影響，是色譜填料性能的重要參數(shù)。當填料顆粒粒徑的大小統(tǒng)一、在填充柱床上分布緊密程度的不統(tǒng)一，粒狀填料間的間隙流動通路不一樣，便會導致填充柱內(nèi)的路徑不統(tǒng)一從而產(chǎn)生多路徑效應。填充柱床上面的溶質(zhì)分子的流動路徑和保留時間各不相同，導致色譜峰變寬，影響溶質(zhì)分子分離結(jié)果。

當相同的溶質(zhì)分子流過色譜柱時，若色譜微球填料粒徑分布不均，就會在填充柱床內(nèi)產(chǎn)生不同的通路，導致經(jīng)過的路徑長短不同，色譜峰變寬，塔板數(shù)變小，柱效降低。

想要有較好的溶質(zhì)分子分離效果，必須要保證使用的色譜填料粒徑、分布情況一致。這樣會減少多路效應，使填充柱床上面的溶質(zhì)分子的流動路徑和保留時間一致，從而色譜峰變窄，理論塔板數(shù)升高，達到的柱效更高。

寫到最后:

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