混合酸酐法是多肽合成縮合方法中最難最有效的方法之一，無機酸、有機酸都可用于形成混合酸酐，通常情況下，獲得廣泛使用的寥寥無幾，譬如氯甲酸烷基酯，如今主要換成了氯甲酸異丁酯。

氯甲酸酯和羧基組分通過反應(yīng)形成酸酐，兩者的羰基相互競爭，氨解反應(yīng)因為其親電性和（或）空間位阻有了可供選擇的區(qū)域。親核試劑胺對氨基酸組分的羧基進行進攻可以在由氯甲酸烷基酯以及N保護的氨基酸羧酸鹽形成混合酸酐時，使預(yù)期的肽衍生物形成，同時釋放出游離酸形式的活性成分。在應(yīng)用氯甲酸烷基酯時，不穩(wěn)定的游離的單烷基碳酸，會立即分解形成相應(yīng)的醇和二氧化碳。

混合酸酐主要通過二氯甲烷、四氫呋喃、二氧六環(huán)、乙腈、乙酸乙酯或DMF中分別溶解N保護的氨基酸或肽使用等當(dāng)量的三級堿處理而形成。然后在－15℃-5℃溫度下，劇烈攪拌，同時將氯甲酸烷基酯加入才能保證不對稱酸酐（活化）形成。再將親核性氨基酸組分在短暫的活化之后加入。如果想很容易地進行混合酸酐法，就要嚴(yán)格遵守上述的反應(yīng)條件。

有些專家對于混合酸酐的穩(wěn)定性，副產(chǎn)物氨基甲酸酯和消旋等方面的減少進行了深入研究，通過這一研究進一步的了解反應(yīng)機理，并且提高了該方法的縮合效率。到目前為止，該方法得到了非常廣泛的應(yīng)用。通過研究產(chǎn)生過量氨基甲酸酯的原因，特別是在異亮氨?；屠i氨?；那闆r下，如果三及堿使用N－甲基哌啶以及溶劑使用二氯甲烷，那么就可以使主要副反應(yīng)得以避免?；旌纤狒獾姆€(wěn)定性比較高，所以水洗滌有機相可以使混合酸酐純化。

在混合酸酐縮合法的實際應(yīng)用中，需要注意以下幾個方面：

盡管對于混合酸酐的形成和隨后的縮合反應(yīng)，含水的DMF可以算作一個好的溶劑，然而相比于使用四氫呋喃或鹵化試劑為溶劑，它對于消旋的促進作用要高得多。

寫到最后:

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