多肽的化學(xué)穩(wěn)定性特別依附于氨基酸的組成和序列。凍干多肽往往比溶液中的對應(yīng)物更穩(wěn)定。下面是多肽的潛在降解方式:

1、水解：

多肽序列中富含Asp(D)十分容易脫水生成環(huán)形酰亞胺中間體。比如，在序列中有Asp-Pro(DP)的前提下，酸催化產(chǎn)生環(huán)狀酰亞胺中間體會(huì)造成肽鏈的切割。類似地，在序列上存在Asp-Gly(DG)的情況下，環(huán)形中間體能夠水解成原始的Asp形式(無害)或可能存在的無活性的異天冬氨酸類似物。最后，任何天冬氨酸類型都能夠充分轉(zhuǎn)化成異天冬氨酸類似物。在較少情況下，包含Ser(S)的序列也能夠生成可以最后切割肽鏈的環(huán)狀酰亞胺中間體。

2、脫酰胺：

在帶有Asn-Gly(NG)或Gln-Gly(QG)的序列中頻頻發(fā)生這類堿催化反應(yīng)，并按照相當(dāng)于Asp-Gly(DG)序列的機(jī)制。DG序列的脫氨基轉(zhuǎn)變成環(huán)型酰亞胺中間體，接著水解生成Asn的天冬氨酸或異天冬氨酸類似物。不僅如此，環(huán)狀酰亞胺中間體可引起外消旋化成Asn的D-Asp或D-iso-Asp類似物，這種很有可能是非活性形式。

3、氧化：

Cys和Met殘基是經(jīng)歷可逆性氧化的重要?dú)埓嫖?。在較高的pH下加快半胱氨酸的氧化，當(dāng)中硫醇更容易去質(zhì)子化并且容易形成鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵。通過用二硫蘇糖醇(DTT)或三(2-羧乙基膦)鹽酸鹽(TCEP)處理來逆轉(zhuǎn)二硫鍵。甲硫氨酸借助化學(xué)和光化學(xué)反應(yīng)方式實(shí)現(xiàn)氧化，生成甲硫氨酸亞砜，進(jìn)一步加強(qiáng)進(jìn)入甲硫氨酸砜，兩者都基本上難以逆轉(zhuǎn)。

4、二酮哌嗪和焦谷氨酸生成：

當(dāng)二甲基哌嗪的產(chǎn)生一般發(fā)生于Gly處在N末端的第三位時(shí)，尤其是若Pro或Gly位干1或2位。該化學(xué)反應(yīng)涵蓋N末端氮的親核攻擊在第二和第三氨基酸之間的酰胺羰基上，其致使二酮哌嗪模式的前兩個(gè)氨基酸的切割。其次，要是Gln在N末端，則焦谷氨酸的產(chǎn)生幾平難以避免。這是相似的反應(yīng)，其中N-末端氮攻擊Gln的側(cè)鏈羰基碳以形成脫氨基的焦谷氨酸多肽衍生物。這樣的轉(zhuǎn)換也發(fā)生于N-末端帶有Asn的多肽中，不過在較小程度上也發(fā)生。

5、外消旋化：

該名詞被廣泛地應(yīng)用于指氨基酸或多肽的完好性的整體損失。外消旋化涵蓋將堿性催化的一種對映異構(gòu)體(通常為L型)的氨基酸轉(zhuǎn)化為L和D-對映異構(gòu)體的1:1混合物。這一點(diǎn)在多肽合成的時(shí)候較為關(guān)注，但成品多肽中存在的問題少些。此外，這類轉(zhuǎn)化很難被發(fā)覺，無法控制。

避免或最小化多肽降解一般的辦法是將多肽以-20℃或者更首選-80℃的凍干形式貯存。倘若肽在溶液中，則應(yīng)當(dāng)通過冷凍每個(gè)等分試樣以避免反復(fù)凍融。要盡量避免暴露在pH>8?？墒?，如需在pH>8時(shí)溶解多肽，則應(yīng)把它暴露降到最低，并把冷卻水溶液。最后，將凍干肽和溶液長久暴露在空氣中的氧氣應(yīng)降到最低。

寫到最后:

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