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我們在用到多肽的時候,會碰到多肽純度和多肽含量這兩個數(shù)據(jù),但為什么會出現(xiàn)多肽純度是95%,然而多肽含量卻只是80%?接下來簡單介紹一下這兩個截然不同的含義。
多肽含量:指的是樣本中多肽類成分相對于其他非多肽類成分所占用的比例;
多肽純度:指的是采用HPLC分析方法在肽鏈的吸收波長214nm處檢測出來的目標多肽的含量;
HPLC不僅能夠檢測目標多肽,還能夠檢測出缺損序列(缺失了一種或多種氨基酸殘基的靶序列),截斷序列(加保護時產(chǎn)生的序列)和脫保護不完整序列(源自于整體合成環(huán)節(jié)或最終的裂解過程)等雜物;不過,HPLC檢測不出水與殘余的鹽份如三氟乙酸鹽,醋酸鹽等,并且在多肽合成過程當中,多肽是依靠三氟乙酸將肽序從樹脂上切割下來的,因此在提純環(huán)節(jié)中會帶來少許的TFA,所以,多肽游離的氨基尾端和其它側(cè)鏈如Arg、Lys、His都能夠形成少許TFA雜質(zhì);再有就是水分,多肽一般使用凍干法脫水,即便是這樣,水也可能因為共價結(jié)合的能力不一樣而不同程度地存在著,所以說,一般簽約的多肽中,往往都帶有TFA鹽和少量的水分,而這都是HPLC檢測不出來的,所以,造成了多肽含量和肽純度的差異。
多肽純度需要用HPLC分析方法檢測得出的,多肽含量是由氨基酸組分分析或紫外分光法測定的。這個信息通常是在那些對肽的濃度非常敏感的研究中,對計算多肽的濃度值是十分重要的。
寫到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務:藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。
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