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怎樣溶解多肽,怎樣選擇多肽溶解劑
作者:固拓多肽合成公司    發(fā)布于:2022年09月21日
摘要:一、怎樣溶解多肽多肽的溶解度在一定程度上依賴于多肽的極性。酸性蛋白溶解于堿性溶液,而堿性蛋白能溶于酸性溶液,含有多種沒有電荷的極性氨基酸殘基或憎水性氨基酸的疏水性多肽和中性化多肽可以先溶解于少許有機(jī)溶劑

一、怎樣溶解多肽

多肽的溶解度在一定程度上依賴于多肽的極性。酸性蛋白溶解于堿性溶液,而堿性蛋白能溶于酸性溶液,含有多種沒有電荷的極性氨基酸殘基或憎水性氨基酸的疏水性多肽和中性化多肽可以先溶解于少許有機(jī)溶劑中,如DMSODMF、醋酸、乙腈、甲醇、丙醇或異丙醇,接著加入水(蒸餾水)稀釋。值得注意的是,帶有甲硫氨酸或半胱氨酸的多肽不可以用DMSO溶解,這是因為DMSO可能會導(dǎo)致側(cè)鏈氧化。

怎樣溶解多肽,怎樣選擇多肽溶解劑

二、溶解性測試的重要意義

在無法確定某條肽鏈的溶解度,為了能夠避免造成不必要的麻煩。低劑量的進(jìn)行多肽溶解測驗是非常有必要的。在不改變多肽理化特性的基礎(chǔ)上,要測驗不同類型的溶劑,直至找出最合適的那種。超聲處理有利于粉碎顆粒并提高溶解度。(特別注意:超聲處理會造成溶液升溫和多肽降解,因此時間不宜過長。)

測驗多肽溶解度不是毫無依據(jù)的任意選擇溶劑。多肽序列本身的理化特性是迅速找到適合溶劑的重要依據(jù)之一。對于多肽溶劑選取,接下來把固拓生物測驗溶解度時經(jīng)常使用選擇根據(jù)里的這三種分享給大家。

1

假如整段肽攜帶電荷是陽性的,代表該肽是堿性的??梢韵仍囍谜麴s水來溶解;要是難溶于水,繼續(xù)試著用少許10%-25%醋酸溶解,倘若還是不成功的情況下,加入一些TFA10-50微升)來增溶,隨后用水稀釋至滿意濃度。

2、

倘若整段肽攜帶電荷是陰性的,代表該肽是酸性的。酸性的多肽可以試著用PBSPH7.4)來溶解,要是不溶的話,加入少許的堿性溶劑,如0.1M的碳酸氫銨,接著加入水稀釋至滿意濃度。帶有游離半胱氨酸的多肽應(yīng)溶解于脫氣的酸性緩沖液中,因為當(dāng)PH值超過7時,巰基能被快速氧化成二硫化物。

3、

假如整段肽電荷是零,證明肽是中性的。中性肽往往溶于有機(jī)溶劑。首先,試著加入少許乙腈、甲醇或異丙醇。相對于極度疏水的多肽,可以使用少許的二甲基亞砜溶解,隨后用水稀釋至滿意濃度。相對于富含自由半胱氨酸的肽,需用到DMF而非DMSO。對具有聚集傾向的肽,可加上6M鹽酸胍或8M尿素,接著進(jìn)行相應(yīng)的稀釋。

 

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSAKLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

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