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萃取法
上世紀(jì)五六十年代,世界上包括中國在內(nèi)的許多國家主要從動物器官中提取多肽。例如,將新生犢牛宰殺,取下其胸腺,然后用震蕩分離生物技術(shù)從犢牛胸腺中分離出肽,制備胸腺肽注射液。這種胸腺素被廣泛用于調(diào)節(jié)和增強人體的細胞免疫功能。
天然生物活性肽分布廣泛,自然界中動物、植物和海洋生物中存在著豐富的生物活性肽,發(fā)揮著多種生理功能,維持著正常的生命活動。這些天然生物活性肽包括抗生素、激素等生物的次生代謝產(chǎn)物,以及存在于各種組織系統(tǒng)中的生物活性肽。
目前,已從人、動物、植物、微生物和海洋生物中分離出許多生物活性肽。然而,生物活性肽在生物體內(nèi)的含量普遍較低,目前從天然生物中分離純化生物活性肽的技術(shù)尚不完善,成本高,生物活性低。
常用的多肽提取分離方法有鹽析、超濾、凝膠過濾、等電點沉淀、離子交換層析、親和層析、吸附層析、凝膠電泳等。其主要缺點是操作復(fù)雜、成本高。
酸堿法
酸水解和堿水解多用于實驗機構(gòu),但在生產(chǎn)實踐中很少使用。蛋白質(zhì)在堿性水解過程中,大部分氨基酸如絲氨酸、蘇氨酸被破壞,發(fā)生外消旋,大量營養(yǎng)物質(zhì)流失。因此,這種方法在生產(chǎn)中很少使用。蛋白質(zhì)的酸水解不會引起氨基酸的外消旋,水解速度快,反應(yīng)完全。但其缺點是工藝復(fù)雜、控制困難、環(huán)境污染嚴(yán)重。肽的分子量分布不均勻且不穩(wěn)定,其生理功能難以確定。
酶水解
大多數(shù)生物活性肽存在于蛋白質(zhì)的長鏈中,處于非活性狀態(tài)。當(dāng)被一種特定的蛋白酶水解時,它們的活性肽從蛋白質(zhì)的氨基序列中釋放出來。酶法從動、植物和海洋生物中提取生物活性肽是近幾十年來的研究熱點。
酶法水解生物活性肽是選擇合適的蛋白酶,以蛋白質(zhì)為底物,水解蛋白質(zhì),獲得大量具有多種生理功能的生物活性肽。在生產(chǎn)過程中,溫度、PH值、酶濃度、底物濃度等因素與小肽酶解效果密切相關(guān),關(guān)鍵是酶的選擇。由于酶解所用的酶不同,酶的選擇和配方不同,蛋白質(zhì)來源不同,得到的多肽的質(zhì)量、分子量分布和氨基酸組成也有很大差異。人們通常選擇動物蛋白酶,如胃蛋白酶和胰蛋白酶,以及植物蛋白酶,如菠蘿蛋白酶和木瓜蛋白酶。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生物酶技術(shù)的不斷創(chuàng)新,將會有越來越多的酶被不斷發(fā)現(xiàn)和利用。酶解技術(shù)成熟,投資低,在生物活性肽的制備中得到了廣泛的應(yīng)用。
寫到最后:
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