一、總述

多肽是特殊的大分子,以至于各段序列在化學(xué)物理結(jié)構(gòu)特征里都是不同尋常的。一部分多肽合成有一定難度,另一部分多肽盡管合成相對(duì)容易,但提純困難?，F(xiàn)實(shí)的問題是大多數(shù)肽微溶于水溶液,那么我們?cè)谔峒冎?/span>,相應(yīng)部分疏水肽必須得溶于非水溶劑中，或指定的緩沖劑,因此這些溶劑或緩沖劑很有可能嚴(yán)重不符使用在生物實(shí)驗(yàn)流程,以至于技術(shù)人員嚴(yán)禁使用該多肽滿足自己的目的,以至于下列是關(guān)于研究人員設(shè)計(jì)多肽的幾個(gè)方面。

二、合成困難肽正確選擇

1.下調(diào)序列總長(zhǎng)度

因?yàn)殡牡某叽缟仙斐纱之a(chǎn)物純凈度下調(diào),低于15個(gè)殘基的肽能較容易得到。當(dāng)肽鏈總長(zhǎng)度提升至20個(gè)殘基以上時(shí),精準(zhǔn)的產(chǎn)品的量則是一個(gè)關(guān)鍵關(guān)注的重點(diǎn)。在諸多實(shí)驗(yàn)中,下調(diào)殘基數(shù)低于20反而容易得到意想不到的效果。

2.下調(diào)疏水殘基數(shù)

疏水殘基占較大優(yōu)勢(shì)的肽，尤其在距C端7-12個(gè)殘基的部位，通常會(huì)引起合成困難。這恰恰被視為因?yàn)楹铣芍蝎@得b折疊片，這么一來(lái)形成不充分組合。在這樣的例子中,用1個(gè)兩個(gè)以上正負(fù)極殘基轉(zhuǎn)換,或放進(jìn)Gly或Pro以解鎖肽構(gòu)成也許會(huì)大有益處。

3.下調(diào)“困難”殘基

有許多種Cys、Met、Arg、Try殘基通常會(huì)不易于合成。Ser通常會(huì)用作Cys的非氧化替代品。

三、提高可溶于水的正確選擇

1.調(diào)整N端或C端

相對(duì)于酸性肽(即pH值為7時(shí)帶負(fù)電荷),特別推薦乙酰化(N端乙?；?/span>,C端始終保持自由羧基),以增加負(fù)電荷。但對(duì)于堿性肽(即pH值為7時(shí)帶正電荷),特別推薦氨基化(N端自由氨基,C端氨基化),以增加正電荷。

2.大大縮短或改長(zhǎng)序列

一部分序列中含有大量的疏水氨基酸,如Trp、Phe、Val、Ile、Leu、Met、Tyr和Ala等,當(dāng)這些疏水殘基超過50%通常會(huì)不易于溶出。為進(jìn)一步提高肽的正負(fù)極,改長(zhǎng)序列也許會(huì)大有益處。第二種選項(xiàng)是根據(jù)下調(diào)疏水殘基的辦法下調(diào)肽鏈的尺寸以增加正負(fù)極。肽鏈正負(fù)極越強(qiáng),就更也許會(huì)與水反應(yīng)。

3.放進(jìn)可溶于水的殘基

對(duì)于一些肽鏈而言,搭配一些正負(fù)極氨基酸可以提高可溶于水的。我們公司推薦給酸性肽的N端或C端再配合Glu-Glu。給堿性肽的N端或C端再配合Lys-Lys。如果不能放進(jìn)帶電荷基團(tuán),也可以將Ser-Gly-Ser放進(jìn)N端或C端。不過,肽鏈的兩側(cè)無(wú)法改變時(shí),這樣的方法則行不通。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

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