在生物學(xué)的研究中，一般會(huì)使用序列較長(zhǎng)的多肽，針對(duì)序列中含60個(gè)以上氨基酸的多肽，一般會(huì)采取基因表達(dá)及SDS-PAGE法來(lái)獲取，不過(guò)此方法時(shí)間長(zhǎng)，最終生成物分離效果不佳等，使固相法長(zhǎng)肽合成技術(shù)成了一種需求。

長(zhǎng)肽合成面臨的挑戰(zhàn)及解決方案

長(zhǎng)肽合成中，我們始終面臨著一個(gè)問(wèn)題，即合成中伴隨序列的增長(zhǎng)，縮合反應(yīng)空間位阻增大，想要反應(yīng)徹底，需要調(diào)整反應(yīng)時(shí)間；不過(guò)隨著反應(yīng)時(shí)間變長(zhǎng)，其所產(chǎn)生的副反應(yīng)也就越多，一部分缺殘基的目標(biāo)肽就繼而形成。這種缺殘基的肽鏈都是長(zhǎng)肽合成環(huán)節(jié)中所產(chǎn)生的關(guān)鍵雜質(zhì)。故此，長(zhǎng)肽的合成環(huán)節(jié)中，我們必須攻克的關(guān)鍵難題是探究高品質(zhì)的反應(yīng)條件和反應(yīng)方法，進(jìn)而使氨基酸縮合反應(yīng)開(kāi)展的更全面更充分。另外減短反應(yīng)時(shí)間，正因?yàn)榉磻?yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，不可控的副反應(yīng)相對(duì)也就越多，副產(chǎn)物就越來(lái)越復(fù)雜。因此，總結(jié)了以下三點(diǎn)：

可以采用微波合成法：針對(duì)合成過(guò)程中遇到的一部分不易整體縮合的氨基酸，可以采用微波法進(jìn)行合成，這種方法成效顯著，并且大大減少了反應(yīng)時(shí)間，并減少了兩種關(guān)鍵副產(chǎn)物的形成。

可以采用片段合成法：當(dāng)一些多肽用常見(jiàn)合成方法合成很困難，并且不易純化時(shí)，我們可以采用將多肽中某段的某幾個(gè)氨基酸整體縮合以后當(dāng)作一個(gè)整體縮合到肽鏈上，此方法也可以解決很多合成中出現(xiàn)的問(wèn)題。

可以采用酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是固相合成的N末端Cys多肽和C末端多肽酰肼之間的化學(xué)選擇性反應(yīng)形成酰胺鍵來(lái)實(shí)現(xiàn)多肽相連的方法。這種方法依據(jù)肽鏈中Cys的位置，將整個(gè)肽鏈分為多條序列分別合成，最終通過(guò)液相合縮反應(yīng)得到目標(biāo)肽，這種方法不但大大減少了長(zhǎng)肽合成時(shí)長(zhǎng)，并且明顯地增加了最終生成物純度，故此廣泛運(yùn)用于含有Cys的長(zhǎng)鏈多肽的合成。

長(zhǎng)肽純化

長(zhǎng)肽的特殊性不可避免而導(dǎo)致所得到的粗品肽組分繁雜，故此，針對(duì)長(zhǎng)肽的HPLC純化也是一個(gè)挑戰(zhàn)；通過(guò)在amyloid系列多肽純化環(huán)節(jié)中，汲取大量經(jīng)驗(yàn)并成功用以長(zhǎng)肽純化，通過(guò)采用新型設(shè)備，多純化體系混用，重復(fù)分離等經(jīng)驗(yàn)手段，大幅提升了我們長(zhǎng)肽純化成功率。

寫(xiě)到最后：

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書(shū)肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。

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