熒光共振能量轉(zhuǎn)移（Fluorescence resonance energy transfer, FRET)

瑩光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET)這是一個(gè)非輻射能量越遷移的過程，供體激發(fā)態(tài)能量通過分子間電偶的相互影響轉(zhuǎn)移到受體激發(fā)態(tài)。這個(gè)過程沒有光子的參與，所以是非輻射的。這種分析方法具有快速、敏感和簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。

FRET試驗(yàn)中使用的染料可以相同。但是在大多數(shù)應(yīng)用中，實(shí)際上使用了不同的染料。簡(jiǎn)單來說，瑩光共振能量的轉(zhuǎn)移是一對(duì)偶極子從供體(染料1)轉(zhuǎn)移到受體(染料2)的過程，當(dāng)供體基團(tuán)激起時(shí)。一般來說，供體（Donor）瑩光基團(tuán)的發(fā)射光譜與受體（Acceptor）基團(tuán)的吸收光譜有一定的重疊。當(dāng)這兩個(gè)瑩光基團(tuán)之間的距離合適時(shí)(10–100?)），可以觀察到瑩光能量從供體向受體的轉(zhuǎn)移。能量轉(zhuǎn)移的方法取決于受體的化學(xué)結(jié)構(gòu)：

1.被轉(zhuǎn)化為分子的振動(dòng)，也就是說，能量轉(zhuǎn)移的瑩光消失了。(受體是猝光劑)

2.發(fā)射比受體本身更強(qiáng)的瑩光特性，導(dǎo)致次級(jí)熒光光譜的紅移。(受體是瑩光發(fā)射體)。

供體基團(tuán)（EDANS）和接受基因（DABCYL）與HIV蛋白酶天然底物連接均勻，當(dāng)?shù)孜餂]有斷開時(shí)，DABCYL可以淬滅EDANS，然后無法檢測(cè)到瑩光。在HIV-1蛋白酶斷開后，EDANS不再被DABCYL淬滅，隨后可以檢測(cè)到EDANS瑩光。通過EDANS熒光強(qiáng)度的變化，可以監(jiān)測(cè)蛋白酶抑制劑的有效性。 

FRET肽是研究肽酶非特異性的方便工具。由于其反應(yīng)過程可以連續(xù)監(jiān)測(cè)，為檢測(cè)酶活性提供了方便的方法。供體/受體對(duì)肽鍵水解后產(chǎn)生的光澤可以衡量納摩爾級(jí)濃度的酶活性。當(dāng)FRET肽完整時(shí)，它顯示了內(nèi)部的閃光突然消失，但當(dāng)供體/受體對(duì)面的任何肽鍵破裂時(shí)，它就會(huì)釋放出閃光，這種閃光可以持續(xù)檢測(cè)，然后可以定量分析酶的活性。

寫到最后:

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