多肽合成主要有兩種方法：化學(xué)合成多肽和生物合成多肽。

化學(xué)合成主要通過氨基酸和氨基酸之間的縮合來進行。在生成含有特定順序的多肽時，由于多肽合成原料中含有單一的氨基酸，其官能度大于2，所以在合成多肽時，應(yīng)暫時保護不需要反應(yīng)的基團，然后才能進行成肽反應(yīng)，從而保證多肽合成目標(biāo)產(chǎn)物的定向性。多肽的化學(xué)合成分為液相合成和固相合成。

多肽液相生成主要分為兩種策略:逐漸合成和片段組合。逐漸生成簡單快捷的多肽片段，可用于合成各種生物活性多肽片段。片段組合法主要包括天然化學(xué)連接和施陶丁格連接。近年來，多肽液相片段合成發(fā)展迅速，在多肽和蛋白質(zhì)合成行業(yè)取得了長足的進步。在多肽片段合成法中，多肽片段可以根據(jù)多肽片段的化學(xué)特定性或化學(xué)選擇性自發(fā)連接，獲得目標(biāo)多肽。由于多肽片段中氨基酸殘留物較少，純度高，易于凈化。

多肽固相合成:人工固相合成多肽通常從序列的C端逐一向N端添加氨基酸。固拓生物多肽合成是Fmoc或Boc的多肽合成(兩種方法的合成過程是一樣的，只是α-去除氨基保護基的方法不同)。

以Fmoc保護策略法為例。生成由以下步驟組成：

①懸掛樹脂：根據(jù)訂單使用并稱相應(yīng)量的樹脂，將其放入反應(yīng)釜中增溶備用。

②保護：Fmoc保護柱和單個保護基團必須使用20%piperidine來清除氨基。

③檢驗：檢驗是否已清除保護基，是否已露出氨基。

④激活和交聯(lián):下一種氨基酸的羧基被一種活性劑激活。活化的單一氨基反應(yīng)與游離氨基反應(yīng)交聯(lián)，產(chǎn)生肽鍵。需要注意的是，氨基酸的投入并不是隨意的。為了保證肽鏈合成的準(zhǔn)確性；氨基酸、縮合劑和堿的比例。這里有一個參考比例。(規(guī)模（mol）：氨基酸：堿=1:3:3:6）

⑤檢驗：檢驗所需氨基酸是否已連接。結(jié)果是陰性，判斷氨基酸已完全連接。

⑥循環(huán)：反復(fù)循環(huán)②-⑤直至生成完成。

⑦將合成的肽從樹脂切割和去保護。(Fmoc策略可以通過TFA(強酸)從樹脂上切除多肽。)固相合成肽鏈。為了減少副反應(yīng)的產(chǎn)生，選擇的一些氨基酸側(cè)鏈由保護基團保護。但是最終的成品只需要肽鏈，需要去除保護基。一般為了操作方便，切割液是根據(jù)肽鏈上不同的保護基提前準(zhǔn)備好的。

⑧使用冰乙醚離心沉淀(至少要洗三次)；洗滌，冷凍干燥。通過MS檢測和HPLC檢測獲得粗品。

多肽的生物合成主要包括發(fā)酵和酶解。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展，DNA重組技術(shù)主導(dǎo)的基因工程方法也應(yīng)用于多肽合成。

寫到最后:

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