化學(xué)方面，二硫鍵指結(jié)構(gòu)為R-S-S-R“官能團(tuán)。二硫鍵通常由兩個(gè)硫醇基團(tuán)組成。在生物學(xué)中，硫醇基團(tuán)之間在兩個(gè)半胱氨酸殘基中形成的二硫鍵是蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)的重要組成部分。這個(gè)鍵對(duì)蛋白質(zhì)分子的立體結(jié)構(gòu)起著重要的作用。

在氧化、DMSO氧化等溫和的氧化過程中，也可采用H2O2、I2、汞鹽等強(qiáng)烈的反應(yīng)條件。

空氣氧化法：

在近中性或弱堿性環(huán)境下(PH值6.5-10)反應(yīng)24小時(shí)以上，氧化法產(chǎn)生二硫鍵是多肽合成中最經(jīng)典的方法，通常是在水中溶解處于還原狀態(tài)的多肽。為了減少分子間二硫鍵的可能性，這種方法通常需要在低濃度條件下進(jìn)行。

碘氧化法：

在25%的甲醇溶液或30%的醋酸溶液中溶解多肽，每滴10-15mol/L的碘進(jìn)行氧化，反應(yīng)為15-40min。當(dāng)肽鏈中含有對(duì)碘敏感的Tyr時(shí)、Trp、在Met和His的殘基過程中，氧化條件控制得更加精確，氧化后，立即加入維他命C或硫代硫酸鈉去除碘過多。

二對(duì)多對(duì)二硫鍵成環(huán)策略

如果序列中含有兩對(duì)或兩對(duì)以上的二硫鍵需要成環(huán)，通常有兩種情況：

自然界隨機(jī)成環(huán)：

Cys在序列中隨機(jī)成環(huán)，類似于一對(duì)二硫鍵成環(huán)條件；

定點(diǎn)成環(huán)：

根據(jù)設(shè)計(jì)要求，指定環(huán)即序列中的Cys產(chǎn)生二硫鍵，反應(yīng)過程復(fù)雜。在固相合成多肽之前，需要提前設(shè)計(jì)幾組二硫鍵產(chǎn)生的順序和方法路線，選擇不同的側(cè)鏈基保護(hù)基，利用其性質(zhì)差異，逐步氧化產(chǎn)生兩對(duì)或兩對(duì)以上的二硫鍵。一般使用的基保護(hù)基是trt，Acm,Mmt,tBu,Bzl,Mob,各種基團(tuán)，如Tmob。

在設(shè)計(jì)了二硫鍵的生產(chǎn)順序和Cys側(cè)鏈保護(hù)策略后，我們應(yīng)該在每對(duì)二硫鍵成環(huán)后，取少量樹脂進(jìn)行切割，并對(duì)切割后的設(shè)備進(jìn)行MS驗(yàn)證。發(fā)貨時(shí)會(huì)一起提供MS驗(yàn)證圖。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有產(chǎn)品僅限科研使用，不得用于人體，如有違反，后果自負(fù)。

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