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蛋白表達(dá)概述
作者:固拓多肽合成公司    發(fā)布于:2023年12月29日
摘要:蛋白表達(dá)(proteinexpression)即重組蛋白表達(dá)是指將目的基因重組復(fù)制到人工媒介(vector)然后引入受體細(xì)胞或無細(xì)胞系統(tǒng),在異源系統(tǒng)中表達(dá)蛋白質(zhì)的技術(shù)。蛋白質(zhì)表達(dá)可以解決天然蛋白質(zhì)難以獲得的問題。20世紀(jì)70年代首次

蛋白表達(dá)(proteinexpression)即重組蛋白表達(dá)是指將目的基因重組復(fù)制到人工媒介(vector)然后引入受體細(xì)胞或無細(xì)胞系統(tǒng),在異源系統(tǒng)中表達(dá)蛋白質(zhì)的技術(shù)。

蛋白質(zhì)表達(dá)可以解決天然蛋白質(zhì)難以獲得的問題。20世紀(jì)70年代首次建立異源基因蛋白表達(dá)后,成功表達(dá)了成千上萬的重組蛋白,有效地促進(jìn)了生物技術(shù)和生物醫(yī)學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展。

目的

通過蛋白質(zhì)表達(dá),首先可以獲得難以從自然來源獲得的蛋白質(zhì)。

其次,蛋白質(zhì)表達(dá)產(chǎn)物批量大,純度高,不僅有利于目的蛋白的分析,而且大大降低了成本。

更重要的是,通常選擇的重組蛋白表示宿主細(xì)胞的生物安全性很高,從而避免了一些病源宿主的潛在生物安全風(fēng)險。

方式

主要包括基因片段復(fù)制、導(dǎo)入表達(dá)系統(tǒng)、誘導(dǎo)表達(dá)、產(chǎn)品凈化分析等過程。

蛋白表達(dá)概述

歸類

蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)一般可分為:

1、核表達(dá)系統(tǒng):大腸桿菌是最常見的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng),具有遺傳背景清晰、繁殖方便、成本低、表達(dá)高等優(yōu)點,但缺乏翻譯修改機制,不適合糖基化或特殊選擇點切割修改蛋白質(zhì)表達(dá),適用于相對分子量小于100k,翻譯后修改不影響蛋白質(zhì)表達(dá)的結(jié)構(gòu)和功能??莶菅挎邨U菌也可用于蛋白質(zhì)表達(dá),其優(yōu)點是代謝表達(dá)能力強,蛋白酶活性低,也逐漸受到重視。

2、真核表達(dá)系統(tǒng):翻譯后可實現(xiàn)一定程度的糖基化,更接近真核蛋白的自然活性。它主要包括在內(nèi)。①酵母表達(dá)系統(tǒng)(常見的紅酵母、釀造酵母等),酵母可以高密度醇厚,翻譯后可以修改,具有原核和真核宿主細(xì)胞的優(yōu)點,也是一個很好的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。②昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):外源基因通過桿狀病毒媒介轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞表達(dá),是真核蛋白的高表達(dá)系統(tǒng),適用于膜蛋白、大分子質(zhì)量蛋白、蛋白激酶等原核系統(tǒng)中難以表達(dá)的蛋白質(zhì)。③哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):哺乳動物細(xì)胞的翻譯和裝飾效率遠(yuǎn)高于酵母和昆蟲細(xì)胞系統(tǒng),其結(jié)構(gòu)和功能更接近天然真核蛋白,但表達(dá)量低,成本高。

3、無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):目的蛋白可以直接從粒子和PCR產(chǎn)物中表達(dá),表達(dá)系統(tǒng)是來自大腸桿菌、小麥胚胎、兔網(wǎng)紅細(xì)胞等的無細(xì)胞提取物。無細(xì)胞蛋白表達(dá)的優(yōu)點是可以表達(dá)其他系統(tǒng)難以表達(dá)的產(chǎn)物、高通量和自動化,但表達(dá)量低,成本高。

寫到最后:

杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有產(chǎn)品僅限科研使用,不得用于人體,如有違反,后果自負(fù)。

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