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定量的兩種方法
任何物理量的定量過程都無非是與“尺子”進(jìn)行比較,質(zhì)譜分析也不例外。實(shí)現(xiàn)質(zhì)譜定量分析的方法有外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法兩種。。
外標(biāo)法
用已知標(biāo)準(zhǔn)樣品A和未知未測(cè)樣品A進(jìn)行實(shí)驗(yàn);我們將獲得以下三個(gè)信息:標(biāo)準(zhǔn)樣品的數(shù)量(已知);標(biāo)準(zhǔn)樣品的信號(hào)強(qiáng)度;待測(cè)樣品的信號(hào)強(qiáng)度。(假設(shè)樣品的響應(yīng)=常數(shù)*濃度,從這三個(gè)信息中計(jì)算待測(cè)樣品的數(shù)量。)
為了更準(zhǔn)確地測(cè)量未知樣品,我們希望標(biāo)準(zhǔn)樣品的信號(hào)強(qiáng)度盡可能接近待測(cè)樣品的信號(hào)強(qiáng)度(以減少非線性響應(yīng)的影響)。因此,常用的標(biāo)準(zhǔn)方法將測(cè)量一系列已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品,繪制工作曲線,然后通過擬合方法確定未知樣品的數(shù)量。
內(nèi)標(biāo)法
外標(biāo)法主要有以下兩個(gè)限制:
1. 樣品和待測(cè)樣品獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn),無法消除實(shí)驗(yàn)間的意外誤差;
2. 2.不同于待測(cè)樣品的基質(zhì)(即待分析物除外的其他成分),基質(zhì)可能會(huì)產(chǎn)生不同的影響和誤差。
然后,如果我們直接將已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品B添加到待測(cè)樣品A中,我們可以在同一實(shí)驗(yàn)和同一基質(zhì)中完成標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品的測(cè)量,這消除了兩個(gè)實(shí)驗(yàn)和不同基質(zhì)造成的誤差,這就是內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)法。(如果添加的標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品是相同的物質(zhì)A,那么由于它們無法區(qū)分,只有一個(gè)實(shí)驗(yàn)不能定量待測(cè)樣品。此時(shí),我們?cè)谔砑訕悠非昂筮M(jìn)行兩次測(cè)量,即測(cè)量待測(cè)樣品和待測(cè)樣品+樣品的信號(hào),以計(jì)算待測(cè)樣品的數(shù)量。)
寫到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業(yè)務(wù):藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環(huán)肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯(lián)BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標(biāo)記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、CY系列)同位素肽等。固拓生物所有產(chǎn)品僅限科研使用,不得用于人體,如有違反,后果自負(fù)。
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